摘要：

多聚甲醛固定是一種常用生物樣本處理技術(shù)，大量用途于組織學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)還有免疫熒光行業(yè)。該方法通過將多聚甲醛〔PFA〕和生物樣本接觸，利用其交聯(lián)作用使蛋白質(zhì)、核酸生物大分子穩(wěn)固下來，從而保存樣本結(jié)構(gòu)特征。

，于進(jìn)行多聚甲醛固定之前，要準(zhǔn)備好適當(dāng)濃度多聚甲醛溶液。通常狀況下，實(shí)驗(yàn)室中使用多聚甲醛固定液為4%濃度，即每100毫升蒸餾水中溶解4克多聚甲醛。于配制過程中，需確保操作環(huán)境通風(fēng)優(yōu)良，并佩戴適當(dāng)個(gè)人防護(hù)裝備，如手套、護(hù)目鏡，以避免吸入或直接接觸有害物質(zhì)。

接下來是具體固定步驟。將待固定組織塊或細(xì)胞樣品放入適量4%多聚甲醛固定液中，確保樣本完全浸沒其中。然后將其置于室溫下靜置一段時(shí)間，一般為15至20分鐘。于此期間，多聚甲醛會(huì)通過化學(xué)反應(yīng)和蛋白質(zhì)中氨基有交聯(lián)，形成穩(wěn)固網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，很好防止樣本內(nèi)部成分降解。對于某些特殊類型樣本，也許還要調(diào)整固定時(shí)間或溫度條件。

完成固定后，應(yīng)立即用緩沖液〔例如PBS磷酸鹽緩沖液〕徹底清洗樣本，去除殘留多聚甲醛，以免影響后續(xù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果。另外，于整個(gè)操作過程中，必須遵守?zé)o菌操作規(guī)范，防止污染，和此同時(shí)妥善處置廢棄物，遵循環(huán)保要求。

4%多聚甲醛固定是一種簡單而很好樣本預(yù)處理手段，能夠顯著增強(qiáng)后續(xù)分析質(zhì)量、可靠性。無論是研究細(xì)胞形態(tài)還是檢測特定蛋白表達(dá)水平，這一技術(shù)都發(fā)揮著不可替代作用。